آشنایی با فرایند  واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)

PCR:

واکنش زنجیره­ای پلیمراز یکی از مهم­ترین کشف­های قرن 21 در زمینه زیست شناسی مولکولی است. مقادیر کم ماده ژنتیکی با این روش تکثیر می­شوند و راه را برای شناسایی، دستکاری DNA، ردیابی ارگانیسم­های عفونی(شامل ویروس­های HIV و هپاتیت) و شناسایی جهش­ها هموار می­کند.

23

PCR شامل سه مرحله است:

Denaturation: جدا شدن دو رشته DNA از همدیگر

Annealing: اتصال پرایمرها به نواحی مکملشان بر روی تک رشته­های DNA الگو

Extension: فعالیت DNA پلیمراز باعث طویل شدن رشته­های DNA از انتهای پرایمرها می­شود.

هر سه مرحله به دما حساس هستند و به ترتیب در دماهای 94، 60 و 70 درجه­ی سانتی گراد کارایی دارند.

 

سنتز DNA به یک پرایمر نیاز دارد و طراحی پرایمر صحیح برای درست انجام شدن یک واکنش PCR بسیار ضروری است.

9

عملکرد آنزیم DNA پلیمراز:

7

نمایی از مراحل اولیه PCR:

10

مطالب مرتبط:

طراحی پرایمر، مفاهیم و تعاریف