
آشنایی با فرایند واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)
آشنایی با فرایند واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)
PCR چیست:
واکنش زنجیره ای پلیمراز یکی از مهمترین کشفهای قرن ۲۱ در زمینه زیست شناسی مولکولی است. مقادیر کم ماده ژنتیکی با این روش تکثیر میشوند و راه را برای شناسایی، دستکاری DNA، ردیابی ارگانیسمهای عفونی(از قبیل ویروسهای HIV و هپاتیت) و شناسایی جهشها هموار میکند.
PCR شامل سه مرحله است:
Denaturation: جدا شدن دو رشته DNA از همدیگر
Annealing: اتصال پرایمرها به نواحی مکملشان بر روی تک رشتههای DNA الگو
Extension: فعالیت DNA پلیمراز باعث طویل شدن رشتههای DNA از انتهای پرایمرها میشود.
هر سه مرحله به دما حساس هستند و به ترتیب در دماهای ۹۴، ۶۰ و ۷۰ درجهی سانتی گراد کارایی دارند.
سنتز DNA به یک پرایمر نیاز دارد و طراحی پرایمر صحیح برای درست انجام شدن یک واکنش PCR بسیار مهم است؛
عملکرد آنزیم DNA پلیمراز:
نمایی از مراحل اولیه PCR:
مطالب مرتبط: